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國(guó)家海洋局《污水生物毒性監(jiān)測(cè)技術(shù)規(guī)程 發(fā)光細(xì)菌急性毒性測(cè)試-費(fèi)歇爾弧菌法》提到,樣品毒性水平的表征方法采用檢測(cè)結(jié)果中的15min發(fā)光抑制率H進(jìn)行評(píng)價(jià)。根據(jù)H大小將毒性等級(jí)分為3級(jí),相應(yīng)等級(jí)分別為低度毒性風(fēng)險(xiǎn)、中度毒性風(fēng)險(xiǎn)、高度毒性風(fēng)險(xiǎn),分級(jí)方法如表1所示。中科院土壤研究所制訂的水質(zhì)毒性分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)中,根據(jù)相對(duì)發(fā)光率的大小將毒性等級(jí)分為低毒、中毒、重毒、高毒、劇毒5個(gè)等級(jí),如表所示。
目前,市面上應(yīng)用最廣泛的發(fā)光細(xì)菌有3種:明亮發(fā)光桿菌、費(fèi)氏弧菌、青海弧菌,如圖1所示。其中,明亮發(fā)光桿菌和費(fèi)氏弧菌為海洋菌,青海弧菌為我國(guó)發(fā)現(xiàn)的淡水菌。ZnSO-4·7H2O對(duì)3種菌種的EC50(單一化學(xué)物質(zhì)使抑光率達(dá)到50%時(shí)該物質(zhì)的濃度)最小的為費(fèi)氏弧菌,費(fèi)氏弧菌的靈敏度更高。
下表列出了明亮發(fā)光桿菌(P.phosphoreum)以及費(fèi)氏弧菌(Vibriofischeri)等所涉的國(guó)內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)。ISO11348的3個(gè)標(biāo)準(zhǔn),主要區(qū)別在于費(fèi)氏弧菌的狀態(tài)不同:第1標(biāo)準(zhǔn)采用的是新鮮制備的費(fèi)氏弧菌;第2標(biāo)準(zhǔn)采用的是液體干細(xì)菌;第3標(biāo)準(zhǔn)采用是凍干粉細(xì)菌。其中,ISO11348-3-2017是應(yīng)用最廣泛的發(fā)光細(xì)菌生物毒性檢測(cè)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)。涉及青海弧菌的暫時(shí)沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn),僅在《水和廢水監(jiān)測(cè)分析方法》第四版書(shū)籍中提到。
ISO11348-3-2017與GB15441—1995相比,主要有以下兩點(diǎn)區(qū)別:
(1)利用的發(fā)光細(xì)菌不同,且保存菌種的溫度不同,前者用的是費(fèi)氏弧菌,保存溫度為-20℃;后者為明亮發(fā)光細(xì)菌,保存溫度為2~5℃;因此,對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的凍干粉而言,冷凍溫度越低越好。
(2)前者要求測(cè)定加入水樣前發(fā)光細(xì)菌的原始熒光強(qiáng)度,并根據(jù)對(duì)照試樣做出校正,避免了細(xì)菌樣品不均勻帶來(lái)的誤差影響。
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