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文章來源:霍爾德電子 發布時間:2022-11-21 13:48:35 瀏覽次數:1674次
浮游植物的大量生長是水體富營養化的主要現象,其中葉綠素a是所有浮游植物門類都含有的葉綠素類型,不僅作為水體營養狀態劃分的重要指標,而且可用于表征浮游植物的現存量。因此,葉綠素a在水體富營養狀況評價中起關鍵性作用。葉綠素a本身對環境沒有危害,但它是估算浮游植物生物量的重要指標,可以通過測定水中浮游植物葉綠素a的含量,掌握水體的初級生產力情況和富營養化水平,在環境監測中,葉綠素a含量是評價水體富營養化的指標之一。
國際上,經濟合作與發展組織(OECD)規定了關于評定湖泊營養狀態的葉綠素a劃分標準,見表1,我國原地表水環境質量標準(GHZB1-1999)中規定了葉綠素a標準值,但是現行有效的地表水環境質量標準(GB3838-2002)沒有葉綠素a的標準值。
水質葉綠素a的測定步驟:
1.提取試劑
除熱乙醇法,國內外標準方法均采用90%丙酮作為提取試劑。EPA446.0指出,90%丙酮溶液可以有效提取大部分藻類細胞中的葉綠素a,而且不產生其他衍生物。丙酮是國際上較為公認的提取葉綠素的試劑
2.濾膜
除《水和廢水檢測分析方法(第四版)》采用乙酸纖維濾膜外,均采用玻璃纖維濾膜。
3.樣品保存方法
樣品的保存條件各種方法略有不同,但水樣采集后均保證4℃冷藏保存,樣品濾膜可冷凍保存。而且葉綠素a測定樣品濾膜冷凍后再研磨,可提高提取效率。暨南大學水生生物研究所的林少君在《浮游植物中葉綠素a提取方法的比較與改進》的研究結果。如采樣后不立刻測定,-18℃下冰凍,再于室溫條件下融解,利用細胞內冰粒的形成和細胞液濃度的增高引起溶漲,使胞壁結構破碎引起葉綠素溶出。
4.是否研磨及研磨后是否需要浸泡
雖然研磨的方法較為費力,但是該方法操作簡單,儀器設備要求低,常溫操作不會對葉綠素a造成破壞,細胞破碎完全,對葉綠素的提取速度快,效率高,并在環境監測系統廣泛應用,考慮到方法的經典性和數據的可沿用性,新的技術線路中關于對葉綠素a的提取步驟沿用《水和廢水監測分析方法(第四版)》中的研磨方法,研磨提取葉綠素a,主要通過機械作用破壞藻類的細胞壁和葉綠體使葉綠素a溶解于丙酮,并在此基礎上進行改進。
5.計算公式及波長
關于計算方法,主要有三色法和單色法,三色法主要考慮了葉綠素b和葉綠素c對測定的干擾,測定的是表觀葉綠素a的含量(包括葉綠素a與脫鎂葉綠素a之和),單色法考慮脫鎂葉綠素a的干擾。從方法的簡便性來說,三色法操作簡單,產生誤差幾率小,耗時比單色法短;目前《水和廢水監測分析方法(第四版)》中測定葉綠素a的方法在地表水環境監測中應用最為廣泛,該方法采用丙酮研磨提取葉綠素a,用三色法計算葉綠素a的濃度。