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文章來(lái)源:霍爾德電子 發(fā)布時(shí)間:2023-01-04 13:25:24 瀏覽次數(shù):942次
葉綠素a本身對(duì)環(huán)境沒(méi)有危害,但它是估算浮游植物生物量的重要指標(biāo),可以通過(guò)測(cè)定水中浮游植物葉綠素a的含量,掌握水體的初級(jí)生產(chǎn)力情況和富營(yíng)養(yǎng)化水平,在環(huán)境監(jiān)測(cè)中,葉綠素a含量是評(píng)價(jià)水體富營(yíng)養(yǎng)化的指標(biāo)之一。
中國(guó)環(huán)境科學(xué)研究院李子成在《中國(guó)湖庫(kù)營(yíng)養(yǎng)現(xiàn)狀調(diào)查分析》中對(duì)湖泊、水庫(kù)的營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)進(jìn)行了分級(jí):
比較國(guó)內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)中葉綠素a測(cè)定的關(guān)鍵步驟在于:提取試劑、濾膜類型、樣品保存方法、是否研磨機(jī)研磨后是否需要浸泡、計(jì)算方法。
1.提取試劑
除熱乙醇法,國(guó)內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)方法均采用90%丙酮作為提取試劑。EPA446.0指出,90%丙酮溶液可以有效提取大部分藻類細(xì)胞中的葉綠素a,而且不產(chǎn)生其他衍生物。丙酮是國(guó)際上較為公認(rèn)的提取葉綠素的試劑
2.濾膜
除《水和廢水檢測(cè)分析方法(第四版)》采用乙酸纖維濾膜外,均采用玻璃纖維濾膜。
3.樣品保存方法
樣品的保存條件各種方法略有不同,但水樣采集后均保證4℃冷藏保存,樣品濾膜可冷凍保存。而且葉綠素a測(cè)定樣品濾膜冷凍后再研磨,可提高提取效率。暨南大學(xué)水生生物研究所的林少君在《浮游植物中葉綠素a提取方法的比較與改進(jìn)》的研究結(jié)果。如采樣后不立刻測(cè)定,-18℃下冰凍,再于室溫條件下融解,利用細(xì)胞內(nèi)冰粒的形成和細(xì)胞液濃度的增高引起溶漲,使胞壁結(jié)構(gòu)破碎引起葉綠素溶出。
4.是否研磨及研磨后是否需要浸泡
雖然研磨的方法較為費(fèi)力,但是該方法操作簡(jiǎn)單,儀器設(shè)備要求低,常溫操作不會(huì)對(duì)葉綠素a造成破壞,細(xì)胞破碎完全,對(duì)葉綠素的提取速度快,效率高,并在環(huán)境監(jiān)測(cè)系統(tǒng)廣泛應(yīng)用,考慮到方法的經(jīng)典性和數(shù)據(jù)的可沿用性,新的技術(shù)線路中關(guān)于對(duì)葉綠素a的提取步驟沿用《水和廢水監(jiān)測(cè)分析方法(第四版)》中的研磨方法,研磨提取葉綠素a,主要通過(guò)機(jī)械作用破壞藻類的細(xì)胞壁和葉綠體使葉綠素a溶解于丙酮,并在此基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn)。
5.計(jì)算公式及波長(zhǎng)
關(guān)于計(jì)算方法,主要有三色法和單色法,三色法主要考慮了葉綠素b和葉綠素c對(duì)測(cè)定的干擾,測(cè)定的是表觀葉綠素a的含量(包括葉綠素a與脫鎂葉綠素a之和),單色法考慮脫鎂葉綠素a的干擾。從方法的簡(jiǎn)便性來(lái)說(shuō),三色法操作簡(jiǎn)單,產(chǎn)生誤差幾率小,耗時(shí)比單色法短;目前《水和廢水監(jiān)測(cè)分析方法(第四版)》中測(cè)定葉綠素a的方法在地表水環(huán)境監(jiān)測(cè)中應(yīng)用最為廣泛,該方法采用丙酮研磨提取葉綠素a,用三色法計(jì)算葉綠素a的濃度。
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