葉綠素a是估算浮游植物生物量的重要指標，可以通過測定水中浮游植物葉綠素a的含量，掌握水體的初級生產力情況和富營養化水平，在環境監測中，葉綠素a含量是評價水體富營養化的指標之一。水質葉綠素a測定方法原理是將一定量樣品用濾膜過濾截留藻類，研磨破碎藻類細胞，用丙酮溶液提取葉綠素，離心分離后分別于750nm、664nm、647nm和630nm波長處測定提取液吸光度，根據公式計算水中葉綠素a的濃度。下面小編分享一下水質葉綠素a測定的具體步驟。

1.制備水樣

在過濾裝置上裝好玻璃纖維濾膜。根據水體的營養狀態確定取樣體積，具體可以參考過濾水樣體積，用量筒量取一定體積的混勻水樣，進行過濾，最后用少量蒸餾水沖洗濾器壁。過濾時負壓不超過50kPa，在水樣剛剛完全通過濾膜時結束抽濾，用鑷子將濾膜取出，將有水樣的一面對折，用濾紙吸干濾膜水分。

2.研磨

將樣品濾膜放置于研磨裝置中，加入3ml-4ml丙酮溶液，研磨至糊狀。補加3ml-4ml丙酮溶液，繼續研磨，并重復1-2次，保證充分研磨5min以上。將完全破碎后的細胞提取液轉移至玻璃刻度離心管中，用丙酮溶液沖洗研缽及研磨杵，一并轉入離心管中，定容至10ml。

3.浸泡提取

將離心管中的研磨提取液充分振蕩混勻后，用鋁箔包好，放置于4℃避光浸泡提取2h以上，不超過24h。在浸泡過程中要顛倒搖勻2-3 次。

4.離心

將離心管放入離心機，以相對離心力1000×g（轉速 3000 r/min～4000 r/min）離心10min。然后用針式濾器過濾上清液得到葉綠素a的丙酮提取液（試樣）待測。

5.水樣測定

將試樣移至比色皿中，以丙酮溶液為參比溶液，于波長750nm、664nm、647nm、630nm處測量吸光度。750nm波長處的吸光度應小于0.005，否則需重新用針式濾器過濾后測定。

6.計算

最后水樣中葉綠素a的質量濃度可以按照相應公式進行計算得出。

以上內容來自于《HJ 897-2017 水質 葉綠素a的測定 分光光度法》，希望對您有所幫助。